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末端脱氧核苷酸转移酶

来自 孔夫子旧书网 的图片

末端脱氧核苷酸转移酶是一个科技名词。

现代汉字是指楷化后的汉字[1]正楷字形,包括繁体字和简体字。现代汉字即从甲骨文、金文[2]、籀文、篆书,至隶书、草书、楷书、行书等演变而来。汉字为汉民族先民发明创制并作改进,是维系汉族各方言区不可或缺的纽带。现存最早可识的汉字是约公元前1300年殷商的甲骨文和稍后的金文, 再到秦朝的小篆 和隶书, 至汉魏隶书盛行,到了汉末隶书楷化为正楷,盛行于魏晋南北朝,至今通行。

目录

名词解释

末端转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase,TdT)是一种无需模板的DNA聚合酶,催化脱氧核苷酸结合到DNA分子的3'羟基端。

【浓度】20u/ul

【性状】悬浮液,重组酶。末端转移酶(Terminal transferase,TdT)是一种无需模板的DNA聚合酶,催化脱氧核苷酸结合到DNA分子的3'羟基端。带有突出、凹陷或平滑末端的单双链DNA分子均可作为TdT的底物。一般操作是:先在载体上打开一单个位点,把它与末端转移酶和某一dNTP(如dATP)一起保温以使添尾,另一待插入的外源DNA片段则用互补的用同法添dNTP(dTTP)用同法添尾。接着使上述两种都接上互补单链尾的DNA片段彼此退火,使形成一杂合载体来转化受体菌。杂合载体中的裂隙或切口可被受体菌所修复。随酶提供10×反应缓冲液和25mMCoCl2

【来源】一般自牛胸腺中分离。

【用途】生化研究。催化DNA的3'末端添加同聚物;DNA的3'末端标记。

功能

"末端转移酶"催化的加上核苷酸至DNA分子的3'末端。不像大多数的DNA聚合酶,它不需要一个模板。这种酶的优选底物是3'突出端,但它也可以添加"核苷酸"(nucleotifes)至"钝末端"(blunt end)或"凹陷的3'末端"(recessed 3' end)。钴是一种必要的辅因子,但是在酶催化后反应在的镁(Mg)和锰(Mn)施用"体外"(in vitro)。

使用

末端转移酶在分子生物学中的应用。它可以被用来在cDNA末端的快速扩增(RACE)中来添加"核苷酸"(nucleotide),然后可以用来作为在后续PCR的"引物"(primer)的模板。它也可以用于添加标记放射性同位素的核苷酸,例如在TUNEL检测(末端脱氧核苷酸转移酶"dUTP缺口末端标记"(dUTP Nick End Labeling)),用于细胞凋亡的示范(其中的标记,在某种程度上,通过片段化DNA来进行)。也可用于治疗"急性淋巴性白血病"诊断之"免疫荧光测定"(immuno-fluorescence)。

在免疫组织化学中,抗体TdT酶可用于显示未成熟的T细胞和B细胞以及多能的"造血(Haematopoiesis)干细胞"的存在,其具有抗原,而成熟的淋巴样细胞总是呈"TdT阴性"。而末端转移酶阳性的细胞中发现少量的健康淋巴结和扁桃体,急性淋巴细胞白血病的恶性细胞也呈"TdT阳性",而抗体,因此可以被用来作为面板诊断及区别这种疾病的一部分,比如,"初发期的小细胞肿瘤"(small cell tumours of childhood)。

参考文献

  1. 中华优秀传统文化——汉字,搜狐,2022-03-30
  2. 华夏古汉字《金文》,搜狐,2022-03-01