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民国十四年（1925年），加入中国共产党，同年秋天，奉党的命令，入黄埔军校。大革命时代，刘志丹曾任国民革命军第四路军政治处处长等职，积极参加反对北洋军阀的战争。大革命失败后，他奔走于湖北、陕西等省，从事组织起义工作。1928年，与唐澍等人组织领导了渭华起义。民国二十年（1931年），“九·一八”事变后，他组织了西北反帝同盟军，任副总指挥及参谋长，后来，反帝同盟军改为中国工农红军陕甘游击支队，刘志丹历任副总指挥、总指挥等职。民国二十一年（1932年）成立红二十六军，刘志丹仍负领导责任。民国二十四年（1935年）秋，红二十六军与红二十五军会师，成立第十五军团，刘志丹任副军团长兼参谋长。这年秋天，刘志丹受到机会主义分子诬陷，被关押起来。毛主席、党中央到达陕北，刘志丹才得到释放，任西北革命军事委员会副主任、北路军总指挥、红二十八军军长等职。民国二十五年（1936年）4月，刘志丹率部队东征，在山西中阳县三交镇战斗中光荣牺牲，时年33岁。