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事實揭露 揭密真相
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  • 2021/9/14 截至台灣13日晚間6時,全球至少2億2455萬8780例確診COVID-19。圖為北市大型疫苗接種站。
    • (中央社台北14日電)日本COVID-19(2019冠狀病毒疾病)疫苗覆蓋率急起直追,至少施打一劑的人口比率在七大工業國集團(G7)中已超越如今墊底的美國。「中國鞋都」福建莆田市陷入嚴峻疫情,鞋廠多已停工。
培養基
原圖鏈接

培養基(Medium)是供微生物、植物組織和動物組織生長和維持用的人工配製的養料,一般都含有碳水化合物、含氮物質無機鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。

  • 不同培養基可根據實際需要,添加一些自身無法合成的化合物,即生長因子。
  • 有些微生物,如自養型微生物,不需要碳源,所以上述物質只具有一般性。
  • 發酵培養基從廣義上而言,是指可供微生物細胞生長繁殖所需的一組營養物質與原料。
  • 同時其也為微生物培養提供其他所必須的條件。發酵培養基的基本作用在於滿足菌體的生長,促進產物的形成。
  • 合成培養基:是指原料其化學成分明確、穩定的培養基。適合於研究菌種基本代謝和過程的物質變化規律,但是培養基營養單一,價格較高,不適合用於大規模工業生產。
  • 天然培養基:這一類培養基採用天然的原料,所以其原料來源豐富(大多為農副產品)、價格低廉、適於工業。然而原料品質等方面不加控制會影響生產的穩定性。
  • 培養基依用途可分為下列六種:

基礎培養基:微生物生長基本要素,可提供大部分微生物生長。 滋養培養基 Enriched media:培養基中加入特殊養分,如血液、血清或動植物抽出液,能提供挑剔性的菌株生長養分。 選擇培養基 Selective media:培養基中加入抑制某一群微生物生長的物質,卻又不影響另一群微生物的繁殖;或含特定菌體生長良好之營養源,使其大量生長。 鑑別培養基 Differential media:培養基中含特殊營養成分,依代謝情況不同,使生長的各種微生物顯現出不同特性。 鑑定細菌特性用培養基:用以測定微生物特性之培養基,如產色素培養基、運動性試驗培養基、酵素能力試驗培養基、基質利用培養基、碳水化合物發酵試驗培養基、測定特殊代謝物試驗培養基。 保存及攜送培養基:維持微生物數目,使在接種至培養基前不增加也不減少。

  • 培養基型態可分為下列三種:

固體培養基:固體培養基含有 1.5~2.0 %的瓊脂。 半固體培養基:含有 0.5~0.8% 的瓊脂。 液體培養基:不含瓊脂,主要用於微生物生長培養增值分離或生化鑑定。

培養基的培養與保存

  • 選擇培養基(Selective mediag):培養基加入某種特殊化學物質,能阻止一群(group)細菌的生長,但不影響另一群細菌的繁殖。
    • 例如eosin methylene blue medium(EMB,伊紅美藍培養基)及MacConkey medium(麥康凱培養基)能讓革蘭氏陰性桿菌〔如Escherichia coli(大腸桿菌)〕生長,但抑制革蘭氏陽性球菌(如葡萄球菌)。
    • 如一些含抗生素的分離培養基(如CAN)能選擇性的抑制某些微生物(腸內菌)生長, 但能讓特定微生物(葡萄球菌)生長良好。
  • 培養基中含有某種特殊化學物質,使能在其生長的各種細菌顯出不同的特性,例如MceConkey medium(麥康凱培養基)生長的乳糖發酵性革蘭氏陰性桿菌呈粉紅色菌落,EMB agar呈深紫色或藍黑色,而乳糖非發酵性在兩者則呈無色菌落。
    • 事實上,MacConkey(麥康凱)及 EMB agar 除了作為區別性培養基外,亦是選擇性培養基,因革蘭氏陽性球菌不能在其上生長。
  • 又如不同種(species)的鏈球菌在BAP上呈現不同的溶血型 式,因此BAP可區分溶血性和非溶血性細菌,所以BAP同時是滋養培養基,也是區別性培養基。
  • 保存及攜送培養基:保存某一純培養菌之活性及生理特性所使用的培養基,例如stock medium(庫存培養基)可作為保存一般腸內桿菌,而GermBank保存裝置(啟新生技生產)能保存各種致病菌。
    • 臨床檢體的攜送,必須做到其中的微生物在接種培養基前不增殖或數目減少,並使各種微生物數量維持一定的比率。因此,有些檢體,尤其是病原微生物數量很低的檢體,必須使用攜送培養基,以達到分離的效果。
    • 例如:由咽喉、鼻腔、耳、眼、直腸、傷口等處收集的棉花拭子檢體,要置於攜送培養基中,常用之攜送培養基包括:

Aerobic CultureSwab(含有Stuart培養基、Amies培養基、或CaryBlair培養基)係針對分離嗜氧菌而設計; Anaerobic CultureSwab或Anaerobic Transtube,培養基與Culture-Swab成分相同,但量較多,係針對分離厭氧菌而設計; Buffered glycerol-saline base係針對分離糞便中志賀氏菌(Shigella spp.)而設計; Campy-transtube係針對分離糞便中彎曲桿菌(Campylobacter spp.)而設計。[1]

可以介紹的幾種培養基配方

  • 培養基是微生物的食物,每個學習微生物專業的人都會接觸到。
    • 培養基的配方根據具體微生物的不同而不同,因此培養基有成千上萬種,但有一些培養基卻是經常用到的。以下的配方可能會對大家有幫助。(摘自生物谷)
  • 1. Acetobacter Medium (醋酸菌培養基)--Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10g/CaCO3 20g Agar (瓊脂) 15g/Distilled water (蒸餾水) 1000ml Adjust (調) pH to 6.8
    • 適用範圍:惡臭醋酸桿菌混濁變種
  • 2. Nutrient Agar (營養肉汁瓊脂)--Pepton (蛋白腖) 5g Beef extract (牛肉膏) 30g/NaCl 5g Agar (瓊脂) 15g/Distilled water (蒸餾水) Adjust (調) pH to 7.0-7.2/[Note]:When cultivation of Bacillus,5mg of to MnSO4.H2O may be added ./It is favorable to promote spore formation .
    • 適用範圍:產氣氣桿菌、糞產鹼桿菌、蠟狀芽孢桿菌、蠟狀芽孢桿菌蕈狀變種、地衣形芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、多粘芽孢桿菌、塵埃芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、嗜熱脂肪芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌深黑變種、蘇雲金芽孢桿菌、蘇雲金芽孢桿菌蠟螟亞種(青蟲菌)、蘇雲金芽孢桿菌戈爾斯德變種、蘇雲金芽孢桿菌猝倒亞種、產氨短桿菌、黃色短桿菌、穀氨酸棒狀桿菌、北京棒桿菌、大腸埃希氏菌(大腸桿菌)、銅綠假單胞菌(綠膿桿菌)、凸形假單胞桿菌、螢光假單胞菌、彎曲假單胞菌、惡臭假單胞菌、假單胞桿菌、藤黃八疊球菌、亞黃八疊球菌、尿素八疊球菌、金黃色葡萄球菌、運動發酵單孢菌
  • 3. Azotobacter Medium (固氮菌培養基)--KH2PO4 0.2g K2HPO4 0.8g/MgSO4.7H2O 0.2g CaSO4.2H2O 0.1g/Na2MoO4.2H2O Trace(微量) Yeast axtract(酵母膏) 0.5g/Mannitol(甘露醇) 20g FeCl3 Tract(微量)/Distilled water (蒸餾水) 1000ml Agar (瓊脂) 15g/Adjust (調) pH to 7.2
    • 適用範圍:固氮菌、膠質芽孢桿菌
  • 4. Corn Meal Medium (玉米粉培養基)--Maize flour (玉米粉) 5g Peptone (蛋白腖) 0.1g/Glucose (葡萄糖) 1g Tap water (自來水) 1000ml/[Note]:Boil the mixture in autoclave at 121℃ for 1 hr. distribute the medium into 18ⅹ18 mm tubes , each contains 10 ml of the liquid , then autoclave at 121℃ for 1 hr . again (15磅蒸煮1小時,分裝入18ⅹ18毫米試管,每管深度達6厘米。15磅再次滅菌15小時。)
  • 5. Lactic-bacteria Medium I (乳酸菌培養基 I )--Yeast extract (酵母膏) 7.5g Peptone (蛋白腖) 7.5g/Glucose (葡萄糖) 10g KH2PO4 2g/Tomato juice (西紅柿汁) 100ml Tween (吐溫) 80 0.5ml/

Distilled water (蒸餾水) 900ml pH 7.0

    • 適用範圍:植物乳桿菌(胚芽乳桿菌)、嗜熱乳酸鏈球菌
  • 6. Lactic-bacteria Midium Ⅱ (乳酸菌培養基 Ⅱ)--Lacto-casein peptone (乳酪蛋白腖) 10g Beef extract (蛋白腖) 10g/Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g/Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g/Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g/MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g/Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8
    • 適用範圍:植物乳桿菌(胚芽乳桿菌)
  • 7. Peotone Glucose Yeast extract Medium PGY (蛋白腖、酵母膏、葡萄糖培養基)--Peptone(蛋白腖) 10g Yeast extract (酵母膏) 5g/Glucose (葡萄糖) 1g Distilled water (蒸餾水) 1L
  • 8. Glycerol Agar (甘油瓊脂)--Peptone (蛋白腖) 5g Beef extract (酵母膏) 3g/Glycerol (甘油) 20g Top water (自來水) 1000ml/Agar (瓊脂) 15g pH 7.0-7.2
  • 9. Rhizobium medium (根瘤菌培養基)AS 9--Yeast eztract (酵母膏) 1g Soil eztract (土壤浸提液) 200ml [2]

參考來源

  1. 【培養基種類】培養基可依照其應用的目的或功能,分為下列數種. Creative. [2021-09-28] (中文). 
  2. 農民伯伯在海南. 146種培養基配方[細菌培養基和植物培養基]. 每日頭條. 2019-05-06 [2021-09-28] (中文).