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鈎端螺旋體(Leptospira)簡稱鈎體,種類很多,可分為致病性鈎體及非致病性鈎體兩大類。致病性鈎體能引起人及動物的鈎端螺旋體病,簡稱鈎體病,是在世界各地都廣泛流行的一種人畜共患病,中國絕大多數地區都有不同程度的流行,尤以南方各省最為嚴重,對人民健康危害很大,是中國重點防治的傳染病之一。[1]

簡介

鈎端螺旋體菌體纖細,長短不一,一般為6~20um,寬0.1~0.2um,具有細密而規則的螺旋,菌體一端或兩端彎曲呈鈎狀,常為「c」、「s」等形狀。在暗視野顯微鏡下可見鈎體象一串發亮的微細珠粒,運動活潑,可曲屈,前後移動或圍繞長軸作快速旋轉。電鏡下鈎體為圓柱狀結構,最外層是鞘膜,由脂多糖和蛋白質組成,其內為胞壁,再內為漿膜,在胞壁與漿膜之間有一根由兩條軸絲扭成的中軸,位於菌體一側。鈎體是以整個圓柱形菌體纏繞中軸而成,鈎體的胞壁成份與革蘭氏陰性桿菌相似。

生物學性狀

形態結構與染色

菌體呈纖細圓柱形,螺旋細密規則,菌體一端或兩端彎曲呈鈎狀。菌體結構自外向內分別是外膜、肽聚糖層和胞膜包繞的細胞質,外膜與肽聚糖層之間有兩根軸絲,各由一端伸至菌體的中央。革蘭染色不易着色,常用Fontana銀染色法,菌體被染成棕褐色,因菌體折光性強,常用暗視野顯微鏡觀察。

培養特性

需氧或微需氧。營養要求較高,常用柯氏培養基培養。最適溫度為28-30C,生長緩慢,在固體培養基中28℃培養2周後可形成半透明、不規則、直徑<2mm的扁平細小菌落。生化反應不活潑,不分解糖類、蛋白質,能產生過氧化氫酶。

抵抗力

對理化因素的抵抗力較其他致病性螺旋體強。夏季在中性水或濕土中可存活數周至數月,對疾病傳播有重要意義。對乾燥、熱、日光抵抗力較弱,56℃10分鐘死亡。對化學消毒劑敏感。對青黴素、多西環素敏感。[2]

抵抗力

鈎體對理化因素的抵抗力較其他致病螺旋體為強,在水或濕土中可存活數周至數月,這對本菌的傳播有重要意義,該螺旋體對乾燥、熱、日光直射的抵抗力均較弱,56℃10分鐘即可殺死,60℃只需10秒,對常用消毒劑如0.5%來蘇、0.1%石炭酸、1%漂白粉等敏感,10~30分鐘可殺死,對青黴素、金黴素等抗生素敏感。

抗原組成

致病性鈎體的抗原組成比較複雜,與分型有關的抗原主要有兩種:一種是表面抗原(p抗原),另一種是內部抗原(s抗原);前者存在於螺旋體的表面,為蛋白質多糖的複合物,具有型特異性,是鈎體分型的依據;而後者存在於螺旋體的內部,是類脂多糖複合物,具有屬特異性,為鈎體分群的依據。全世界已發現20個血清群,200多個血清型,我國至少發現了18個血清群,70多個血清型。[3]

致病性

致病物質

  1. 溶血毒素:不耐熱,對氧穩定,具有類似磷脂酶的作用,能使細胞膜溶解,當注入小羊體內時,可使小羊出現貧血、出血壞死、肝腫大與黃疸、血尿等。
  2. 細胞毒因子:在試管內對哺乳動物細胞有致細胞病變作用,小鼠腦內接種1~2小時後出現肌肉痙攣,呼吸困難,最後死亡。
  3. 內毒素樣物質;其性質不同於一般細菌的內毒素,但也能使動物發熱,引起炎症和壞死。

此外,鈎體在宿主體內的代謝產物如有毒脂類以及某些酶類:如脂酶脫氫酶萘酰氨酶三油酸脂酶脲酶等,可損害毛細血管壁,使其通透性升高,引起廣泛出血,對腎也有損害,可致血尿、蛋白尿等。

致病過程及臨床類型

鈎體病為自然疫源性疾病,在野生動物和家畜中廣泛流行。鈎體在腎小管中生長繁殖,從尿中排出。腎長期帶菌的鼠和豬是鈎體的重要儲存宿主和傳染源。的尿污染的水源、稻田、小溪、塘水等稱為疫水,人在參加田間運動、防洪、捕魚等接觸疫水時,由於鈎體有較強的侵襲力,能穿過正常或破損的皮膚和粘膜,侵入人體。進食被病鼠排泄物污染的食物或飲水時,鈎體可經消化道粘膜進入人體,也可經胎盤感染胎兒引起流產;此外,鈎體還可經吸血昆蟲傳播。

人群普通對鈎體易感,但發病率高低與接觸疫水的機會和機體免疫力有關。以農民、支農外來人員、飼養員及農村青少年發病率較高。鈎體病主要有在多雨、鼠類等動物活動頻繁的夏、秋季節流行,這時節環境被鈎體污染嚴重,加之農忙,人們與疫水接觸機會多。

鈎體通過皮膚黏膜侵入機體,約在局部經7~10天潛伏期,然後進入血流大量繁殖,引起早期鈎體敗血症。在此期間,由於鈎體及其釋放的毒性產物的作用,出現發熱、惡寒、全身酸痛、頭痛結膜充血腓腸肌痛。鈎體在血中約存在一個月左右,隨後鈎體侵入肝、、心、淋巴結中樞神經系統等組織器官,引起相關臟器和組織的損害和體徵。由於鈎體的菌型、毒力、數量不同以及機體免疫力強弱不同,病程發展和症狀輕重差異很大,臨床上常見有下列幾種類型:

  1. 流感傷寒型:是早期鈎體敗血症的症狀,臨床表現如流感,症狀較輕,一般內臟損害也較輕。
  2. 黃疸出血型:除發熱、惡寒、全身痛處還有出血、黃疸及肝腎損害症狀。出血可能與毛細血管損害有關,即鈎體毒性物質損傷血管內皮細胞,使毛細血管通透性增高,導致全身器官,主要是肝、、腎點狀出血或瘀斑,表現為便血及肘細胞損傷,出現黃疸。
  3. 肺出血型:有出血性肺炎症狀,如胸悶咳嗽咯血紫紺等,病情兇險,常死於大咯血,死亡率高。

此外,尚有腦膜腦炎型,腎功能衰竭型,胃腸炎型等,均表現相應器官損害的症狀;部分病人還可能出現恢復期併發症,如眼葡萄膜炎腦動脈炎失明癱瘓等,可能是由於變態反應所致。

鈎體菌型與鈎體臨床分型無固定關係,臨床分型隨病情發展也可變動。

免疫性

感染早期機體可通過非特異性免疫殺滅鈎體,但作用不強。感染1~2周後血中可出現特異性抗體,具有調理、凝集和溶解鈎體,增強吞噬細胞的吞噬作用。特異性抗體出現後可迅速清除血中鈎體,一般7~10天可把器官中的鈎體清除,但腎臟中鈎體受抗體影響較小,維持時間長。故尿中可較長時間(數周~數年)排菌。[4]

鈎體隱性感染或病後可獲得對同型鈎體的持久免疫力,以體液免疫為主,細胞免疫作用不大。

實驗檢查

病原學檢查

發病一周內取血液,第二周以後取尿,有腦膜型症狀者取腦脊液進行檢查。

  1. 顯微鏡檢查直接鏡檢:取抗凝血1000轉/分、離心10分鐘,除去血細胞;血漿再以10000轉/分,離心40分鐘,棄上清取沉澱物暗視野顯微鏡檢查。染色鏡檢:塗片後用Fontana鍍銀染色鏡檢。另外,還可用免疫熒光法或免疫酶染色法檢查。
  2. 分離培養與鑑定將血液數滴接種於柯氏(Korthoff)培養基(4.5~5ml),每份標本接種2~3管,於30℃培養5天,每隔3~5天,用暗視野顯微鏡檢查一次。如有鈎體生長,再傳代培養,用生長良好的菌液作鑑定,陰性者至少培養30~40天,仍未查到才能報告。尿液標本一般需濃縮(離心)後培養,培養時需加抑菌劑如5-氟尿嘧啶等;也可將標本接種於豚鼠腹腔進行分離。

血清學試驗

一般在病初及發病2~3周各採血一次進行下列試驗。

  1. 顯微鏡凝集試驗:是常用的方法,用標準株或當地常見菌侏作抗原,分別與病人不同稀釋度的血清混合,在37℃作用2小時,然後滴片作暗視野顯微檢查。若待檢血清中有某型抗體存在,則在同型抗原孔中可見鈎體凝集成團,形如小蜘蛛,一般病人凝集效價在1:400以上或晚期血清比早期血清效價高4倍以上有診斷意義。
  2. 間接凝集試驗將鈎體屬特異性抗原吸附於載體上成為具有鈎體屬特異性的顆粒抗原,常用的載體有綿羊紅細胞、活性炭、乳膠顆粒等,這些抗原致敏的顆粒在玻片上與病人血清中相應的抗體作用,可出現肉眼可見的凝集。此法敏感性差,但快速簡便,尤其是炭凝集及乳膠凝集試驗,適於基層醫療單位作鈎體病的輔助診斷。

另外,補體結合試驗、間接免疫熒光試驗、ELISA等血清學方法亦可用於診斷。

致病因子

鈎端螺旋體病是由鈎端螺旋體(Leptospira)引起的一種。鈎端螺旋體屬於螺旋體目(Spirochaetales)螺旋體科(Spirochaetaceae)。有兩個種,其中問號鈎體(Leptospirainterroans)是人和動物的寄生菌。分為18個血清群,群之下又有160多個血清型,其中波摩拿群(L.pomona)、犬群(L.canicola)、塔拉索夫群(L.tarassovi)、黃疸出血群(L.icterohemorrhaiae)、流感傷寒群(L.rippotyphosa)七日熱群(L.hebdomadis)是家畜的重要病原菌。有些畜群同時可感染幾種血清群和血清型。本病流行於世界各國,中國也有發生,沿海和長江以南各省較為常見。

鈎端螺旋體的自然宿主主要是鼠類動物,某些哺乳類動物也是其主要宿主。鈎體由病畜和帶菌者的尿中排出體外,通過粘膜或受傷的上皮表面侵入畜體,鼻腔、咽喉、口腔和食道的粘膜以及眼結膜常是感染的門戶。病豬的臨診表現不一,成年豬往往不出現或有輕微症狀,但當爆發本病時則發生、和。仔豬的主要症狀是黃疸、高燒,死亡不常見。病豬往往是長期帶菌者和排菌者。牛的症狀可分為最急性、亞急性和慢性3型。最急性型常發生於懷孕牛,發病突然,高燒,粘膜深度黃染。亞急性型多發生於泌乳牛,病期約兩周,很少死亡。但產奶量減少,牛奶變紅,或有血凝塊;可見黃疸。慢性型病期可延長到2個月以上,多數無明顯症狀。犢牛的症狀是高燒、黃疸和血尿,俗稱犢牛血尿病,死亡率高。

馬屬動物一般不出現症狀,以亞臨診感染較為常見,急性病例出現短期高燒,接着出現黃疸,溶血性貧血和粘膜小點出血。有的馬前期雖無明顯症狀,後期則出現周期性眼炎。犬可由黃疸出血群菌引起發病,呈現高燒黃疸等,在出現症狀後幾小時到幾天內死亡。也可由犬群菌引起,黃疸不常見,舌和口腔粘膜有潰瘍和壞死區,少尿,最後常因尿毒血症死亡。一般不出現症狀。較少患本病。

可用凝集試驗和補體結合試驗或熒光抗體法進行診斷。也可採用鈎端螺旋體分離法進行確診。在病的急性期採血,或在急性期之後2周采尿接種幼齡豚鼠或直接培養,可檢驗鈎端螺旋體。取死畜肝、腎切片,用鍍銀法染色鏡檢也是一種檢驗方法。早期用抗生素治療效果最好。對帶菌和排菌動物可用硫酸鏈黴素治療。接種菌苗是常用的預防方法。滅鼠也是切斷傳染源的重要措施。

防治措施

  • 第一,避免犬與帶菌動物(尤其是豬與鼠類)及被其尿所污染的水,飼料接觸。被污染的環境,可用2~5%漂白粉溶液,或2%氫氧化鈉,或3%來蘇兒消毒。
  • 第二,驅鼠、滅鼠。
  • 第三,嚴禁飼餵病畜肉及帶菌動物的生肉及其他產品。
  • 第四,對較大的犬群每年進行1次檢疫,發現病犬及可疑感染犬,應及時隔離。青黴素鏈黴素對本病有很好的療效,尤其在早期應用,效果更好。但必須連續治療3~5天,才能起到消除腎臟內鈎端螺旋體的作用。
  • 第五,採取藥物預防。我國尚無犬用鈎端螺旋體菌苗,國內外有與其他疫苗結合的多聯苗,可給犬預防接種,但菌苗必須包括當地主要流行菌型。如無菌苗,可在流行期間採用藥物預防,即在飼料中加入土黴素(每千克飼料加入土黴素0.75~1.5克)或四環素(按1~1.5毫克/千克體重),連餵7天,可控制犬的感染。
  • 第六,飼養病犬的人員,不要再與健犬接觸。

視頻

鈎端螺旋體-原因,症狀,診斷,治療,病理

視頻

2020昭昭傳染病鈎端螺旋體病視頻課程

參考文獻